Page 32 - 《广西植物》2023年第6期

１ ０ １ ８ 广 西 植 物 ４３ 卷
主要针对少数的原生种及商业品种ꎬ检测出的特 下解析 ５ ｍｉｎꎬ启动仪器采集数据ꎮ 色谱条件:采
征香气相对单一ꎬ未能通过挥发性物质对品种类 用 ＨＰ￣ＩＮＮＯＷＡＸ 色谱柱ꎬ长 ６０ ｍ、内径 ０.２５ ｍｍ、
群进行分类ꎮ 因此ꎬ本研究采用顶空固相微萃取 液膜厚 ０.２５ μｍꎻ载气为高纯度氦气(９９.９９％)ꎬ不
与气相色谱－质谱联用( ＧＣ￣ＭＳ) 的芳香植物香气 分流模式进样ꎬ隔垫吹扫流速为 ３ ｍＬｍｉｎ ꎬ柱流
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收集分析方法ꎬ系统地对栽培的 ８ 个香花蝴蝶兰 速为 １ ｍＬｍｉｎ ꎮ 程序升温:进样口温度 ２５０ ℃ ꎬ
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新型杂交品种在盛花期时的香气成分进行全面分 柱 温 起 始 温 度 ４５ ℃ 下 保 持 １ ｍｉｎꎬ先 以 ５ ℃
析ꎬ旨在深入了解不同蝴蝶兰品种花朵的香味组 ｍｉｎ 升至 ２００ ℃ ꎬ再以 １５ ℃ ｍｉｎ 升至 ２５０ ℃ ꎮ
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分及其含量ꎬ并以花香成分为基础进行聚类分析ꎬ 质谱条件:传输线接口温度维持在 ２５０ ℃ ꎬ离子源
区分香味特征各异的品种群体ꎬ为芳香蝴蝶兰种 温度 ２３０ ℃ ꎬ四级杆温度 １５０ ℃ ꎬ电离方式为 ＥＩꎬ
质资源梳理、特定香味品种选育及产品加工生产 电子能量参数 ７０ ｅＶꎬ发射电流为 ２００ μＡꎮ 以扫描

等进一步研究与开发利用提供理论依据ꎮ 方式获得质谱数据ꎬ检测质量扫描范围( ｍ / ｚ) 为
２０ ~ ５００ ａｍｕꎬ溶剂延迟时间为 ３ ｍｉｎꎮ
１ 材料与方法 １.２.３ 数据分析 香味组分经气相色谱分离形成
各自的总离子流色谱图ꎬ解析各个峰所对应的质
１.１ 材料和仪器 谱图ꎮ 将所得到的质谱数据与计算机谱库 ＮＩＳＴ１７
供试材料:Ｆ１(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ‘Ｎｏｂｂｙ’ ｓ Ｄｏｃｔｏｒ’ × 标准库检索及资料进行比对ꎬ按相似度最高原则
Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ‘Ｙａｐｈｏｕ Ｙｅｌｌｏｗ Ｓｔｏｒｙ’)、Ｆ２(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ 结合网站对应物质所列举的相关文献确定样品中
‘Ｓａｍｅｌａ Ｂｌｕｅ’×Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ)、Ｆ３(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ 的挥发性化学成分ꎮ 根据离子流峰面积归一化
ｓｐｅｃｉｏｓａ ‘Ｊｉａｈｏ Ｓｐｏｔ ＳＭ/ ＴＯＧＡ ８２Ｐ’)、Ｆ４(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ 法ꎬ计算各组分在总挥发物中的相对含量且进行
‘Ｓｕｐｅｒ Ｚｅｂｒａ’)、Ｆ５(ＧＳ ０３２)、Ｆ６(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ 定量分析ꎮ 每个样品分别进行 ３ 次平行重复试
‘Ｐｕｒｐｌｅ Ｐｉｘｉｅ’)、 Ｆ７ ( Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ × ｓｉｂ)、 Ｆ８ 验ꎮ 利用软件 Ｅｘｃｅｌ ２０１０ 整理汇总数据且制作图
(Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ‘Ｙａｐｈｏｎ Ｃｈｒｉｓｔｍａｓ Ｒｅｄ Ｓｐｏｔｓ’)８ 个香花 表ꎬ主成分分析、聚类分析及偏最小二乘分析运用
蝴蝶兰新型杂交品种ꎬ均取自福建农林大学森林 软件 Ｏｒｉｇｉｎ Ｐｒｏ ２０１９ｂ、Ｍｅｔａｂｏ Ａｎａｌｙｓｔ ５.０ 进行分
兰苑温室大棚ꎬ期间正常水肥管理ꎮ 各挑选 ３ 株 析处理ꎮ
盛花期且长势一致的盆栽苗ꎬ于测试前 １ ｄ 搬至样
品前处理室ꎬ以适应环境条件ꎮ 于 １２ 月 ２２—３０ 日 ２ 结果与分析
１０:００—１４:００ 期间摘取盛开 ７ ｄ 的鲜花进行测
定ꎬ每个样品取 ３ 个生物学重复样本ꎮ ２.１ 不同蝴蝶兰品种花香成分及其相对含量
仪器:手动 ＳＰＭＥ 进样器和 ５０ / ３０ μｍ ＤＶＢ / ８ 个蝴蝶兰品种中共检测出 ９６ 种挥发性成分
ＣＡＲ / ＰＤＭＳ 萃 取 头 ( 美 国 Ｓｕｐｅｌｃｏ 公 司)ꎻ Ａｇｉｌｅｎｔ (表 １)ꎬ虽然不可避免地在不同品种中测出相同
７８９０Ｂ ＧＣ￣５９７７Ｂ ＭＳ 和 Ａｇｉｌｅｎｔ 的 ＨＰ￣ＩＮＮＯＷＡＸ 的香气物质ꎬ但每个品种都因挥发性成分不同比
(６０ ｍ × ０.２５ ｍｍ × ０.２５ μｍ)色谱柱ꎮ 例的相互组合而表现出独特的花香特征ꎮ 成分乙
１.２ 方法 酸甲酯在各品种中均被检测出来ꎬ相对含量差异
１.２.１ ＨＳ￣ＳＰＭＥ 萃取 取样前将固相微萃取头在 很大ꎮ 乙酸甲酯物质在 Ｆ１、Ｆ５ 和 Ｆ７ 中含量较高ꎬ

气相色谱进样口老化 ３０ ｍｉｎꎬ老化温度 ２５０ ℃ ꎮ 分别为 ２４.６９％、１４.０７％和 １７.０５％ꎬ推测物质乙酸
摘取盛花时期蝴蝶兰花朵样品ꎬ整朵撕开ꎬ置于垫 甲酯为 ３ 个品种的主要香气成分之一ꎮ
片密封的 ２５ ｍＬ 萃取瓶中ꎬ加入 １ μＬ 含 ０.１％癸酸 萜烯类组分的相对含量在蝴蝶兰中具有重要
乙酯的甲醇( 色谱级) 溶液为内标ꎬ将老化好的萃 地位ꎬ不同品种的蝴蝶兰所检测出的萜烯类物质
取头插入样品瓶顶空部分ꎬ萃取纤维位于样品上 具有较大差异ꎮ ６ 个蝴蝶兰品种 Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４、Ｆ６
方 １ ｃｍ 处ꎬ固定手柄ꎬ顶空瓶置于 ３５ ℃ 水浴条件 和 Ｆ７ 中均检测出倍半萜物质 α￣香柑油烯ꎬ物质释
下吸附 ３０ ｍｉｎꎮ 放均为高表达ꎬ推测它是 ６ 个品种的主要香气之
１.２.２ ＧＣ￣ＭＳ 分析 吸附完成后将固相微萃取头 一ꎮ β￣红没药烯在 Ｆ３ 和 Ｆ７ 中较高表达ꎬ含量可达
抽回ꎬ插入气相色谱 －质谱联用仪进样口ꎬ２５０ ℃ １２.９９％和 １１.４％ꎬ 推测 β￣红没药烯是 Ｆ３ 和 Ｆ７ 的