Page 169 - 《广西植物》2020年第9期

１ ３ ８ ４ 广 西 植 物 ４０ 卷
小时后测定其吸光度ꎬ相同条件下测定空白对照
溶液吸光度ꎬ以 Ｖｃ 为对照品ꎮ
１.２.５.２ 黑老虎叶总黄酮对ＯＨ 自由基清除能力
的测试 参照姜秀娟等(２０１８) 的水杨酸法ꎬ测试
最优条件下提取的黑老虎叶总黄酮( 溶于 ７０％乙

醇)在不 同 浓 度 下 ( ０. ０２５、０. ０５、０. ０７５、０. １、０. ２、
０.４、０.６、０.８ ｍｇｍＬ ) 对ＯＨ 自由基的清除能
￣１
力ꎬ以 Ｖｃ 为对照品ꎮ
１.２.５.３ 黑老虎叶总黄酮对超氧阴离子清除能力的
测试 将最优条件下提取的黑老虎叶总黄酮溶解
于 ７０％ 的 乙 醇 配 制 成 不 同 浓 度 ( ０. ０２５、 ０. ０５、 图 １ 提取时间对黑老虎叶总黄酮得率的影响
￣１
０.０７５、０.１、０.２、０.４、０.６、０.８ ｍｇｍＬ ) 样品溶液ꎬ Ｆｉｇ. １ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｏｔａｌ
参照范艳丽等(２０１７) 的邻苯三酚氧化法ꎬ测定以 ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｋａｄｓｕｒａ ｃｏｃｃｉｎｅａ ｌｅａｖｅｓ
上样品溶液对超氧阴离子的清除能力ꎬ相同条件

下测定空白对照溶液吸光度ꎬ以 Ｖｃ 为对照品ꎮ
１.３ 数据处理分析

所有实验都重复进行 ３ 次ꎬ所得数据都以平均
值±标准误差表示ꎬ采用 Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ ２０１０、ＳＰＳＳ
２０.０、 Ｄｅｓｉｇｎ Ｅｘｐｅｒｔ８.０.６ 软件进行数据处理、分析
及绘图ꎮ

２ 结果与分析

２.１ 单因素试验 图 ２ 乙醇浓度对黑老虎叶总黄酮得率的影响
２.１.１ 提取时间对黑老虎叶总黄酮提取率的影响 Ｆｉｇ. ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｏｔａｌ

如图 １ 所示ꎬ在 １５ ~ ３５ ｍｉｎꎬ黑老虎叶总黄酮提 ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｋａｄｓｕｒａ ｃｏｃｃｉｎｅａ ｌｅａｖｅｓ
取率随着时间的延长而逐渐增加ꎬ ３５ ｍｉｎ 时达到
最大值 ４. ３１％ꎻ随着时间的延长ꎬ提取率 有 所 下 度的增大ꎬ醇溶性杂质提取程度也会增大ꎬ由于杂
降ꎮ 这可能是因为时间较短时ꎬ黑老虎叶总黄酮 质与黄酮存在竞争关系ꎬ从而导致黄酮提取率的
并没有提取完全ꎬ所以时间增长提取率增大ꎻ然而 降低(艾薇等ꎬ２０１８)ꎮ 因此ꎬ乙醇浓度优化实验范
加热提取时间较长则可能会破坏黄酮的结构而导 围为 ６０％ ~ ８０％ꎮ

致黑 老 虎 叶 中 总 黄 酮 提 取 率 下 降 ( 李 欣 燃 等ꎬ ２.１.３ 提取温度对黑老虎叶总黄酮提取率的影响
２０１９)ꎮ 因 此ꎬ 提 取 时 间 优 化 试 验 范 围 为 ２５ ~ 如图 ３ 所示ꎬ温度低于 ６０ ℃ 时ꎬ黑老虎叶总黄
４５ ｍｉｎꎮ 酮提取率随着温度的增加逐渐增大ꎬ６０ ℃ 达到最
２.１.２ 乙醇浓度对黑老虎叶总黄酮提取率的影响 大值 ４.５３％ꎬ随后提取率逐渐降低ꎮ 这可能是由
如图 ２ 所示ꎬ在乙醇浓度为 ４０％ ~ ７０％ꎬ黑老虎 于温度的升高分子间运动变得剧烈ꎬ增大了黄酮
叶总黄酮提取率呈线性递增ꎬ７０％ 时达到最大值 与乙醇的接触机会ꎬ所以提取率增大ꎻ但温度过高
４.６２％ꎬ随后提取率下降ꎮ 根据“ 相似相溶” 原理ꎬ 也会造成部分黄酮结构破坏ꎬ从而降低提取率( 张
黑老虎叶总黄酮的极性与 ７０％乙醇极性相似ꎬ所 军武和赵琦ꎬ２０１２)ꎮ 因此ꎬ提取温度优化实验范
以在乙醇浓度为 ７０％时提取率最大ꎻ随着乙醇浓 围为 ５０ ~ ７０ ℃ ꎮ