Page 36 - 《广西植物》2025年第10期
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１ ７ ６ ６ 广 西 植 物 ４５ 卷
津企业管理( 中国) 有限公司]ꎻＨＤ ５００ ＭＨｚ 核磁 (１.８ ｃｍ × １６ ｃｍ) 柱 色 谱 分 离ꎬ以 甲 醇 － 水 溶 液
共振波谱仪( 德 国 布 鲁 克 公 司)ꎻＴｏｙｏｐｅａｒｌ Ｂｕｔｙｌ￣ (０％ ~ ５０％ꎬＶ / Ｖ)为洗脱剂进行梯度洗脱ꎬ得到化
６５０Ｃ、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ￣４０Ｆ(日本 Ｔｏｓｏｈ 公司)ꎻＤｉａｉｏｎ 合物 １０(７ ｍｇ)ꎮ
ＨＰ２０ＳＳ(日本三菱化学公司)ꎻＳｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０( 瑞 Ｆｒ.４(８１.８ ｇ) 经 ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ ( ７.５ ｃｍ ×
典 ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ 公司)ꎻＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ(日本三 １８ ｃｍ)ꎬ甲醇－水溶液(１０％ ~ １００％ꎬＶ / Ｖ) 梯度洗
菱化学公司)ꎻＣｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｃ ( 日本富士硅化学有 脱ꎬ得 到 １６ 个 流 分 Ｆｒ. ４. １ － Ｆｒ. ４. １６ꎮ Ｆｒ. ４. ４ 经
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限公司)ꎮ Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ＳＳ(２.０ ｃｍ × １８ ｃｍ) 分离得到化合物
α￣葡萄糖苷酶( 美国西格玛奥德里奇公司)ꎻ ２(９８ ｍｇ)、化合物 １１( ２７ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ. ４. ７ 经 Ｄｉａｉｏｎ
甲醇、乙腈(色谱纯ꎬ美国斯百全公司)ꎻ阿卡波糖 ＨＰ２０ＳＳ(３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ)、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ６５０ Ｃ(１.８ ｃｍ ×
(上海源叶生物科技有限公司)ꎻ甲醇、乙醇、石油 ２２ ｃｍ) 纯 化 得 到 化 合 物 ９ ( ８８ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ. ４. １１ 经
醚(分析纯ꎬ西陇化工股份有限公司)ꎻ对硝基苯￣ Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ＳＳ(３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ)、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０
α￣Ｄ￣吡喃葡萄糖苷( ｐＮＰＧꎬ上海源叶生物科技有 (３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ)、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ￣４０Ｆ(２.０ ｃｍ × １８
限公司)ꎻ磷酸缓冲液( ＰＢＳꎬ北京索莱宝科技有限 ｃｍ)柱 色 谱 分 离ꎬ 以 甲 醇 － 水 溶 液 ( １０％ ~ ９０％ꎬ
公司)ꎮ Ｖ / Ｖ)为洗脱剂进行梯度洗脱ꎬ得到化合物 １３(４.１
１.３ 提取和分离 ｇ)、化合物 ４ 和化合物 ５ 的混合物(６ ｍｇ) 和化合
取湄公锥干燥叶(５.５ ｋｇ)ꎬ用粉碎机粉碎成合 物 ６ ( １８ ｍｇ )ꎮ Ｆｒ. ４. １３ 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０
适大小ꎬ用 ７０％ 甲醇溶液重复提取 ３ 次( 室温浸 (３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ) 柱 色 谱 分 离ꎬ 得 到 ５ 个 流 分
泡ꎬ每次 ４０ Ｌꎬ每次 ７ ｄ)ꎬ合并滤液ꎬ减压蒸馏后得 Ｆｒ.４.１３.１ －Ｆｒ.４.１３.５ꎮ Ｆｒ.４.１３.３ 经甲醇溶剂反复
到浸膏(９０９ ｇ)ꎮ 总浸膏经石油醚萃取 ３ 次ꎬ萃取 结晶得到化合物 １４(８５ ｍｇ)ꎻＦｒ.４.１３.５ 经甲醇溶
液减压浓缩得到石油醚部分 ３５８ ｇ、水部分 ５１０ ｇꎮ 剂反复结晶得到化合物 １７(５４１ ｍｇ)ꎮ
水部分经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(９.５ ｃｍ × ３２ ｃｍ)柱色谱 Ｆｒ.５(１５４.１ ｇ)经 Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ＳＳ(９.５ ｃｍ × ２０
分离ꎬ以甲醇－水溶液(０％ ~ １００％ꎬ每 ２０％为 １ 梯 ｃｍ)柱色谱分离ꎬ用甲醇－水溶液(１０％ ~ １００％ꎬＶ /
度ꎬ每梯度 ２ Ｌ)为洗脱剂进行洗脱ꎬ用高效液相色 Ｖ) 梯 度 洗 脱ꎬ 得 到 １３ 个 流 分 Ｆｒ. ５. １ － Ｆｒ. ５. １３ꎮ
谱和薄层色谱检测ꎬ粗分划段ꎬ合并得到 ７ 个组分 Ｆｒ.５.１ 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ)、Ｄｉａｉｏｎ
Ｆｒ.１－Ｆｒ.７ꎮ ＨＰ２０ＳＳ(２.０ ｃｍ × ２０ ｃｍ) 纯化得到化合物 １２(８２
Ｆｒ.１(４０.０ ｇ)先后经 ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ(７.５ ｃｍ × ｍｇ)ꎻＦｒ.５.２ 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(３.０ ｃｍ × ２５ ｃｍ)
１８ ｃｍ)、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(４.２ ｃｍ × ２３ ｃｍ)、Ｄｉａｉｏｎ 柱色谱分离ꎬ再经甲醇溶剂反复结晶得到化合物 ７
ＨＰ２０ＳＳ(１.８ ｃｍ × ２３ ｃｍ)、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｃ (２.０ ｃｍ × (８２７ ｍｇ)ꎻＦｒ.５.７ 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(３.０ ｃｍ × ２５
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２５ ｃｍ) 柱色谱分离ꎬ以甲醇－水溶液( ０％ ~ ４０％ꎬ ｃｍ)、Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ＳＳ( ２.０ ｃｍ × ２０ ｃｍ) 柱色谱分
Ｖ / Ｖ) 梯 度 洗 脱ꎬ 得 到 化 合 物 ８ ( ２１２ ｍｇ) ꎮ Ｆｒ. ２ 离ꎬ以甲醇－水溶液(１０％ ~ ７０％ꎬＶ / Ｖ) 为洗脱剂进
(２３.７ ｇ) 经 ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ ( ７.５ ｃｍ × １８ ｃｍ) 行梯度洗脱ꎬ得到化合物 １５ 和化合物 １６ 的混合物
得到 ８ 个流分 Ｆｒ.２.１ －Ｆｒ.２.８ꎮ Ｆｒ.２.１( ６.６ ｇ) 经 (４５ ｍｇ)ꎮ
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ ( １. ８ ｃｍ × ２０ ｃｍ) 、 Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ １.４ α￣葡萄糖苷酶抑制活性测试
Ｃ (１.６ ｃｍ × １６ ｃｍ) 柱色谱分离ꎬ以甲醇 －水溶 α￣葡萄 糖 苷 酶 抑 制 活 性 测 试 参 考 李 婷 等
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液(０％ ~ １００％ꎬＶ / Ｖ) 为洗脱剂进行梯度洗脱ꎬ得 (２００５)的方法ꎬ并做适当调整ꎮ 实验分为只含底
到化 合 物 １ ( ５ ｍｇ) ꎮ Ｆｒ. ２. ２ ( １. ８ ｇ ) 先 后 经 物的空白对照组、添加酶的空白组、添加样品的反
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ ( １. ８ ｃｍ × ２０ ｃｍ ) 、 Ｄｉａｉｏｎ 应对照组、添加样品和酶的反应组ꎮ 以 ５０ ｍｍｏｌ
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ＨＰ２０ＳＳ(１.８ ｃｍ × ２０ ｃｍ) 柱色谱分离ꎬ以甲醇 － Ｌ 的 ＰＢＳ 溶液为溶剂系统ꎬ取适量对硝基苯基￣α￣
水溶液( ０％ ~ １００％ꎬＶ / Ｖ) 为洗脱剂进行梯度洗 Ｄ￣吡喃葡萄糖苷( ｐＮＰＧ) 配置成 １ ｍｍｏｌＬ 的溶
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￣１
脱ꎬ得到化合物 ３(２５ ｍｇ) ꎮ 液ꎬ将购买的 １０ Ｕｍｇ α￣葡萄糖苷酶配制成酶
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Ｆｒ.３(１８.５ ｇ)先后经 ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ(７.５ ｃｍ × 活力为 ０.５ ＵｍＬ 的酶溶液备用ꎬ以阿卡波糖为
１８ ｃｍ)、 Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ￣４０Ｆ ( ４. ２ ｃｍ × ２３ ｃｍ)、 阳性对照ꎮ 将 ５０ μＬ ＰＢＳ 磷酸缓冲液加入 ９６ 孔板
Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ＳＳ(２.０ ｃｍ × １８ ｃｍ)、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ Ｃ 中ꎬ在反应组和反应对照组中分别加入 ４０ μＬ 不
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