Page 162 - 《广西植物》2025年第3期

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Ｇｕｉｈａｉａ Ｍａｒ. ２０２５ꎬ ４５(３): ５４２－５５４

ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２３０５０５１
刘宝骏ꎬ 付传明ꎬ 苏江ꎬ 等ꎬ ２０２５. 文采报春苣苔 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因的克隆与表达分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ４５(３): ５４２－５５４.
ＬＩＵ ＢＪꎬ ＦＵ ＣＭꎬ ＳＵ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２５. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｗＤＲＥＢ２ｓ ｇｅｎｅｓ ｉｎ Ｐｒｉｍｕｌｉｎａ ｗｅｎｔｓａｉｉ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ
４５(３): ５４２－５５４.

文采报春苣苔 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因的克隆与表达分析

刘宝骏ꎬ 付传明ꎬ 苏 江ꎬ 冼康华ꎬ 何金祥ꎬ 黄宁珍 ∗

广 西 壮 族 自 治 区
( 广西植物研究所ꎬ 广西喀斯特植物保育与恢复生态学重点实验室ꎬ 广西 桂林 ５４１００６ )
中 国 科 学 院
摘 要: 脱水响应元件结合蛋白 ２( ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ２ꎬ ＤＲＥＢ２) 是一种转录因
子ꎬ在模式植物应答干旱、高盐和热激胁迫中起调控作用ꎮ 然而ꎬ在适应喀斯特干热石山环境的文采报春苣
苔(Ｐｒｉｍｕｌｉｎａ ｗｅｎｔｓａｉｉ) 中ꎬ这些基因的功能尚不清楚ꎮ 筛选对干热双重胁迫联合响应的文采报春苣苔
ＤＲＥＢ２ 同源基因ꎬ可为苦苣苔抗逆种质的创制提供新的基因储备ꎮ 该研究首先根据文采报春苣苔转录组的
序列信息设计特异引物ꎬ以 ｇＤＮＡ 和 ｃＤＮＡ 为模板分离 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因ꎬ然后通过生物信息学方法ꎬ对氨基
酸序列、系统进化关系及保守基序进行分析ꎬ再使用半定量 ＲＴ￣ＰＣＲ(ｓｑＲＴ￣ＰＣＲ) 分析 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因在低
温、热激、模拟干旱(渗透)、高盐、外源 ＡＢＡ 及氧化等单一胁迫下的表达模式ꎬ最后选择能同时应答模拟干
旱与热激的成员ꎬ利用实时荧光定量 ＰＣＲ(ｑＲＴ￣ＰＣＲ)检测其在单一和复合干热处理中的转录本水平ꎮ 结果
表明:(１)分离获得了 ８ 条缺少内含子的 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因ꎬ编码 １９８ ~ ３８６ 个氨基酸ꎬ拥有 ＡＰ２ / ＥＲＦ 结构域、
核定位信号或转录激活域等典型特征序列ꎻ(２) ＰｗＤＲＥＢ２Ａ / ２ＡＬ１ / ２ＡＬ２、ＰｗＤＲＥＢ２Ｄ / ２ＤＬ 和 ＰｗＤＲＥＢ２Ｆ 转

录因子被分别归入 Ａ￣２ 亚组的亚型 １、亚型 ２ 和亚型 ３ꎬＰｗＤＲＥＢ２ＥＬ１ / ２ＥＬ２ 转录因子则被归入 Ａ￣６ 亚组ꎻ
(３)ＳｑＲＴ￣ＰＣＲ 分析表明 ＰｗＤＲＥＢ２ｓ 基因表达受多种单一胁迫的诱导ꎬ其中 ＰｗＤＲＥＢ２Ａ / ２ＡＬ１ / ２ＡＬ２ / ２Ｄ 基因
能同时应答模拟干旱与热激胁迫ꎻ(４) ｑＲＴ￣ＰＣＲ 结果揭示了在液体培养条件下ꎬＰｗＤＲＥＢ２Ｄ 基因对干热处
理的应答具有组织特异性ꎬ仅能在根状茎中被强烈诱导ꎮ 在土壤栽培条件下ꎬ与对照相比时ꎬ除 ＰｗＤＲＥＢ２Ｄ
基因以外ꎬＰｗＤＲＥＢ２Ａ / ２ＡＬ１ / ２ＡＬ２ 基因在自然干旱－热激复合胁迫中的转录反应显著增强ꎮ 与单一的自然
干旱和高温处理相比时ꎬＰｗＤＲＥＢ２ＡＬ１ / ２ＡＬ２ 基因在自然干旱－热激复合胁迫中的表达水平显著升高ꎮ 由此
可见ꎬＰｗＤＲＥＢ２ＡＬ１ / ２ＡＬ２ 基因在文采报春苣苔干热复合胁迫应答中可能发挥了重要的调控作用ꎮ
关键词: 文采报春苣苔ꎬ ＤＲＥＢ２ 转录因子ꎬ 肉质叶ꎬ 干旱－热激复合胁迫ꎬ 表达模式
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２５)０３￣０５４２￣１３

Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｗＤＲＥＢ２ｓ

ｇｅｎｅｓ ｉｎ Ｐｒｉｍｕｌｉｎａ ｗｅｎｔｓａｉｉ

ＬＩＵ Ｂａｏｊｕｎꎬ ＦＵ Ｃｈｕａｎｍｉｎｇꎬ ＳＵ Ｊｉａｎｇꎬ ＸＩＡＮ Ｋａｎｇｈｕａꎬ
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ＨＥ Ｊｉｎｘｉａｎｇꎬ ＨＵＡＮＧ Ｎｉｎｇｚｈｅｎ

收稿日期: ２０２４－０２－１２ 接受日期: ２０２４－０３－２７
基金项目: 中央引导地方科技发展资金项目(桂科 ＺＹ２１１９５０３５)ꎻ 广西科学院基本业务费项目(ＣＱＺ￣Ｅ￣１９１０)ꎻ 广西喀斯特植物
保育与恢复生态学重点实验室课题(２０￣０６５￣７)ꎮ
第一作者: 刘宝骏(１９８６—)ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ研究方向为园艺植物遗传育种与生物技术ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｂｊｌｉｕｍａｉｌ＠ １２６.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 黄宁珍ꎬ研究员ꎬ研究方向为植物生理生化ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)１４９９５３３７６８＠ ｑｑ.ｃｏｍꎮ