Page 144 - 《广西植物》2025年第7期

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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｌ. ２０２５ꎬ ４５(７): １３３６－１３４７

ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２４０９０１４
王嘉琪ꎬ 王惠冉ꎬ 王佳伟ꎬ 等ꎬ ２０２５. 冬枣 ｃＤＮＡ 三框表达文库构建及 ＺｊＲＷＤ４０ 基因上游调控因子的筛选 [Ｊ]. 广西
植物ꎬ ４５(７): １３３６－１３４７.
ＷＡＮＧ ＪＱꎬ ＷＡＮＧ ＨＲꎬ ＷＡＮＧ ＪＷꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２５. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ￣ｆｒａｍｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ Ｚｉｚｙｐｈｕｓ ｊｕｊｕｂａ ｃｖ. Ｄｏｎｇｚａｏ
ｃＤＮＡ ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｕｐｓｔｒｅａｍ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ＺｊＲＷＤ４０ ｇｅｎｅ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ４５(７): １３３６－１３４７.

冬枣 ｃＤＮＡ 三框表达文库构建及 ＺｊＲＷＤ４０

基因上游调控因子的筛选

王嘉琪 ꎬ 王惠冉 ꎬ 王佳伟 ꎬ 周 军 ꎬ 任玉锋 ꎬ
１
１ꎬ３
１ꎬ２
１ꎬ２
１
徐文娣 １ꎬ２∗ ꎬ 张 琨 ꎬ 乔 帅 ꎬ 张智凯 １
１
１
( １. 北方民族大学 生物科学与工程学院ꎬ 银川 ７５００２１ꎻ ２. 宁夏经济林遗传改良创新团队ꎬ
银川 ７５００２１ꎻ ３. 甘肃连城国家级自然保护区管理局ꎬ 兰州 ７３０３３３ )
摘 要: 冬枣是重要的以食代药鲜食水果ꎬＲＷＤ４０ 通过调节 ＤＮＡ 甲基化水平影响下游基因表达和调控果
实发育ꎬ进而影响果实风味品质ꎮ ＲＷＤ４０ 蛋白是参与甲基化调控途径的关键蛋白ꎬ为了揭示冬枣中何种上
游蛋白调控 ＲＷＤ４０ 基因的表达ꎬ该研究利用酵母单杂交技术初步筛选冬枣 ＺｊＲＷＤ４０ 基因的上游候选调控
因子ꎮ 结果表明:(１) 冬枣 ｃＤＮＡ 三框表达文库的滴度为 ４× １０ ＣＦＵｍＬ ꎬ重组率为 １００％ꎮ (２) 从冬枣
￣１
９
ＺｊＲＷＤ４０ 基因家族启动子区筛选了应激防御元件 ＡＢＲＥ、ＭＢＳ 和 ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆꎬ分别以其诱饵序列构建诱饵
载体ꎬ命名为 Ｂａｉｔ１￣ＡＢＲＥ、Ｂａｉｔ２￣ＭＢＳ 和 Ｂａｉｔ３￣ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆꎮ (３) 酵母单杂交筛选上游调控因子的结果显
示ꎬＢａｉｔ１￣ＡＢＲＥ 具有自激活现象ꎬＢａｉｔ２￣ＭＢＳ 和 Ｂａｉｔ３￣ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆ 诱饵载体初步调取 １１ 条基因序列ꎬ其中 ５
条与植物抗逆反应直接相关ꎬ它们可能通过与 ＭＢＳ 元件和 ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆ 元件互作来调控冬枣 ＺｊＲＷＤ４０ 基
因的表达ꎬ进而调控冬枣的 ＤＮＡ 甲基化水平ꎮ 该研究结果为揭示 ＺｊＲＷＤ４０ 基因调控冬枣果实发育分子网
络机制提供一定的参考ꎬ同时为冬枣抗逆育种奠定理论基础ꎮ
关键词: 冬枣ꎬ ＲＷＤ４０ 基因ꎬ ｃＤＮＡ 文库ꎬ 酵母单杂交ꎬ 顺式作用元件
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２５)０７￣１３３６￣１２

Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ￣ｆｒａｍｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ Ｚｉｚｙｐｈｕｓ

ｊｕｊｕｂａ ｃｖ. Ｄｏｎｇｚａｏ ｃＤＮＡ ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ
ｕｐｓｔｒｅａｍ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ＺｊＲＷＤ４０ ｇｅｎｅ

１ １ １ꎬ３ １ꎬ２ １ꎬ２
ＷＡＮＧ Ｊｉａｑｉ ꎬ ＷＡＮＧ Ｈｕｉｒａｎ ꎬ ＷＡＮＧ Ｊｉａｗｅｉ ꎬ ＺＨＯＵ Ｊｕｎ ꎬ ＲＥＮ Ｙｕｆｅｎｇ ꎬ
１ꎬ２∗ １ １ １
ＸＵ Ｗｅｎｄｉ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｋｕｎ ꎬ ＱＩＡＯ Ｓｈｕａｉ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｚｈｉｋａｉ

收稿日期: ２０２５－０１－２５ 接受日期: ２０２５－０３－０６
基金项目: 国家自然科学基金(３２０６０６６９)ꎻ 经济林遗传改良创新基金(２０２２ＱＣＸＴＤ０４)ꎻ 第六批宁夏青年科技人才托举工程项
目ꎻ 北方民族大学研究生创新项目(ＹＣＸ２４１３８)ꎮ
第一作者: 王嘉琪(２０００—)ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事植物遗传育种研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｗｊｑ０１１８１１２８＠ １６３.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 徐文娣ꎬ博士ꎬ讲师ꎬ研究方向为植物遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｘｕｗｅｎｄｉ２０１８＠ ｎｍｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ