Page 95 - 《广西植物》2025年第7期

７ 期 朱博为等: 巴西蕉 ＭａＣＭＯ 和 ＭａＢＡＤＨ 原核表达体系筛选及纯化 １ ２ ８ ７

Ａ. Ｒｉｅｓｋｅ 型 [２Ｆｅ￣２Ｓ]结构域ꎻ Ｂ. 铁结合位点ꎮ
Ａ. Ｒｉｅｓｋｅ￣ｔｙｐｅ [２Ｆｅ￣２Ｓ] ｄｏｍａｉｎꎻ Ｂ. Ｉｒｏｎ￣ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ.
图 ２ ＣＭＯ 蛋白多重序列比对
Ｆｉｇ. ２ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ ＣＭＯ ｐｒｏｔｅｉｎ

ｔｈａｌｉａｎａ)、番茄( Ｓｏｌａｎｕｍ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ)、玉米( Ｚｅａ ＭａＣＭＯ 酶活性中心的空间构象高度相关ꎮ 铁结
ｍａｙｓ)、 水 稻、 菠 菜、 大 豆 ( Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ )、 甜 瓜 合基序的完整保留及氧化还原相关结构域的高度
(Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ)及葡萄(Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ)８ 个代表性物 保守性ꎬ证实了 ＭａＣＭＯ 具备典型的铁离子结合能
种 的 ＣＭＯ 蛋 白 序 列 ( ＮＣＢＩ 数 据 库 来 源)ꎬ 与 力与氧化还原酶生物学功能ꎮ
ＭａＣＭＯ 蛋白构建进化树(图 １)ꎮ 系统发生学拓扑 ２.２ ＭａＢＡＤＨ 系统进化分析及多重序列比对
分 析 表 明ꎬ ＭａＣＭＯ 与 单 子 叶 植 物 ＺｍＣＭＯ 和 研究筛选 ＮＣＢＩ 数据库中水稻、玉米、拟南芥、
ＯｓＣＭＯ 聚集成簇ꎬ提示其具有最近的进化亲缘性ꎻ 烟 草 ( Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ )、 番 茄、 大 豆、 陆 地 棉
而与双子叶植物 ＳｏＣＭＯ 和 ＡｔＣＭＯ 则呈现较远的 (Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ)、 甜 瓜 ８ 个 物 种 已 注 释 的
遗传距离ꎮ 多重序列比对分析(图 ２) 显示ꎬ９ 种植 ＢＡＤＨ 蛋白序列ꎬ与 ＭａＢＡＤＨ 构建进化树( 图 ３)ꎮ
物 ＣＭＯ 蛋白序列一致性达 ５８.７７％ꎬ均完整保留 系统发生学拓扑结构显示ꎬ双子叶植物 ＮｔＢＡＤＨ
Ｒｉｅｓｋｅ 型 [２Ｆｅ￣２Ｓ] 特征结构域及铁离子结合位 和 ＳｌＡＤＨ 聚集成独立进化分支ꎬ与 ＭａＢＡＤＨ 遗传
点ꎮ 进化保守性分析揭示植物 ＣＭＯ 蛋白 Ｃ 端结 距离最远ꎬ而单子叶植物 ＯｓＢＡＤＨ 和 ＺｍＢＡＤＨ 则
构域 的 序 列 保 守 性 显 著 高 于 Ｎ 端ꎬ 该 特 征 与 与 ＭａＢＡＤＨ 形成紧密进化簇ꎮ 进一步解析多重序