Page 114 - 《广西植物》2025年第8期

１ ４ ８ ０ 广 西 植 物 ４５ 卷

Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ 分别表示 ＧＰＢ、Ｇａｌｂｒａｉｔｈｓ、ＬＢ０１、Ｏｔｔｏｓ、ＷＰＢ 和 ＴｒｉｓＭｇＣｌ ２ ６ 种提取液处理 ０.５ ｇ 欧洲云杉 ＰａＶⅢ ＰＥＭ 提取细胞
核的上机检测结果ꎬ提取液名称后数字为每种细胞核提取液获得的细胞核总数ꎬＰ３ 为细胞核碎片ꎬＰ４ 为完整细胞核ꎬ数字表示
各自占总细胞核数的百分比(％)ꎮ Ｇ０ / Ｇ１、Ｇ２ / Ｍ 分别表示处于 Ｇ０ / Ｇ１、Ｇ２ / Ｍ 细胞周期的细胞核ꎮ
Ａꎬ Ｂꎬ Ｃꎬ Ｄꎬ Ｅꎬ ａｎｄ Ｆ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＧＰＢꎬ Ｇａｌｂｒａｉｔｈｓꎬ ＬＢ０１ꎬ Ｏｔｔｏｓꎬ ＷＰＢ ａｎｄ ＴｒｉｓＭｇＣｌ ２ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒｓ
ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ０.５ ｇ ＰａＶⅢ ＰＥＭｓ. Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｎａｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ ｉｓ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｎｕｃｌｅｉ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｏｒ ｅａｃｈ ｎｕｃｌｅｕｓ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒꎬ Ｐ３ ｉｓ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｆｒａｇｍｅｎｔꎬ Ｐ４ ｉｓ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｎｕｃｌｅｕｓꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｎｕｃｌｅｉ
(％). Ｇ０/ Ｇ１ ａｎｄ Ｇ２/ Ｍ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｇ０/ Ｇ１ ａｎｄ Ｇ２/ Ｍ ｐｈａｓｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ.
图 ２ 不同细胞核提取液细胞核提取效果检测
Ｆｉｇ. ２ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｎｕｃｌｅｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒｓ

ＫＣｌ、 ＮａＣｌ 和 少 量 β￣巯 基 乙 醇、 Ｎａ ＥＤＴＡ 及 ２０１１ꎻ Ｍｏｕｓｓｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ꎻ Ｇｏｎｚáｌｅｚ￣Ｖａｌｅｎｚｕｅｌａ ｅｔ
２
ＴｒｉｔｏｎＸ￣１００ 等ꎬ三( 羟甲基) 氨基甲烷用于溶解核 ａｌ.ꎬ ２０２３)ꎮ ＬＢ０１ 所含有的化学成分特点可能与
酸ꎬＫＣｌ 和 ＮａＣｌ 维持电解质平衡ꎬ有利于维持细胞 欧洲云杉 ＰＥＭ 特性相匹配ꎬ但 ＬＢ０１ 的成分之一
内外的渗透压( 李明等ꎬ２０１９)ꎮ β￣巯基乙醇则有 (即 β￣巯基乙醇) 具有毒性ꎬ高浓度的 β￣巯基乙醇
还原剂的作用ꎬ可破坏二硫键ꎬ有利于蛋白质和多 会破坏皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道(Ｄｏｌｅｚｅｌ ｅｔ ａｌ.ꎬ

糖类物质的降解( Ｙｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１７)ꎮ ＴｒｉｔｏｎＸ￣１００ ２００７)ꎬ寻找低毒甚至无毒的代替品ꎬ如二硫苏糖
和 ＥＤＴＡ 可以破坏细胞膜ꎬ使得细胞核易于释放 醇(ＤＬ￣Ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌꎬ ＤＤＴ) ( 冯婷婷ꎬ２０１７)ꎬ开发
出来(李明ꎬ２０１５ꎻ徐晶晶ꎬ２０１７)ꎮ 本研究中ꎬ欧洲 更快捷无毒的细胞核提取液将是后续进一步优化
云杉 ＰＥＭ 包 含 部 分 早 期 体 细 胞 胚 胎 ( Ｓｕáｒｅｚ ＆ 的方向ꎮ
Ｂｏｚｈｋｏｖꎬ ２００８)ꎬ其细胞壁包含更多的多糖类物 流式细胞仪检测具有一定局限性ꎬ其对细胞
质ꎬ具更大厚度和更复杂结构( Ｄｏｂｒｏｗｏｌｓｋａ ｅｔ ａｌ.ꎬ 的检测和分类是基于细胞形态学和荧光物质ꎬ 无