Page 115 - 《广西植物》2025年第8期

８ 期 胡继文等: 基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选 １ ４ ８ １

表 １ 不同细胞核提取液的细胞核参数
Ｔａｂｌｅ １ Ｎｕｃｌｅｕｓ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｎｕｃｌｅｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒｓ

Ｇ０ / Ｇ１ Ｇ２ / Ｍ
提取液
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ 细胞核数量 变异系数 细胞核数量 变异系数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｎｕｃｌｅｉ ＣＶ (％) Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｎｕｃｌｅｉ ＣＶ (％)

ＧＰＢ １ ２５５ ７.６ ３６４ １０.０
Ｇａｌｂｒａｉｔｈｓ １ ８７５ ５.１ ２６５ ８.０
ＬＢ０１ ３ ００２ ５.０ ５４９ ４.４
Ｏｔｔｏｓ ２ ９６８ ５.６ ２８４ ７.７
ＷＰＢ ８５３ ６.５ ９０ ８.９
８２１ ６.４ ５９ ５.７
ＴｒｉｓＭｇＣｌ ２

基因型间稳定性高且显微观测 ＬＢ０１ 提取细胞核
膜完整性高ꎮ 总体而言ꎬＬＢ０１ 为最优提取液ꎬ可
有效提取欧洲云杉 ＰＥＭ 细胞核ꎬ为针叶树细胞核
提取提供参考ꎮ

参考文献:

ＡＬＩ Ｍꎬ ＹＡＮＧ Ｔꎬ ＨＥ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４. Ｐｌａｎｔ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ｗｉｔｈ ｓｉｎｇｌｅ￣ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ: ｒｅｃｅｎｔ ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔｓ
ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ [Ｊ]. Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓꎬ ４３: ７５.
ＣＨＥＮ Ｌꎬ ＰＡＮ ＺＺꎬ ＤＡＩ Ｙꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０. Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ
相同字母表示不同细胞系差异不显著(Ｐ<０.０５)ꎮ
ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅａｒ ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎｓ
Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｌｅｔｔｅｒ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ (Ｐ<０.０５). ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ [ Ｊ ]. Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｂｕｌｌｅｔｉｎꎬ ３６(１１): ２３０－２３７. [陈林ꎬ 潘贞志ꎬ 戴毅ꎬ 等ꎬ
图 ３ ＬＢ０１ 细胞核提取液提取不同 ２０２０. 适合流式细胞仪分析的大豆细胞核解离液的筛选
细胞系细胞核的结果分析
与应用 [Ｊ]. 生物技术通报ꎬ ３６(１１): ２３０－２３７.]
Ｆｉｇ. ３ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｉ ｏｂｔａｉｎｅｄ
ＣＯＬＬＩＮＧＳ ＤＡꎬ ＣＡＲＴＥＲ ＣＮꎬ ＲＩＮＫ ＪＣꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１. Ｐｌａｎｔ
ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗｉｔｈ ＬＢ０１
ｎｕｃｌｅｉ ｃａｎ ｃｏｎｔａｉｎ ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ｇｒｏｏｖｅｓ ａｎｄ ｉｎｖａｇｉｎａｔｉｏｎｓ
ｎｕｃｌｅｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ
[Ｊ]. Ｔｈｅ Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌꎬ ３３(５): １４２０－１４３５.
ＤＯＢＲＯＷＯＬＳＫＡ Ｉꎬ ＭＡＪＣＨＲＺＡＫ Ｏꎬ ＢＡＬＤＷＩＮ ＴＣꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ
法准确识别某些类型的细胞膜破损情况ꎮ 本研究 ２０１１. Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｐｒｏｔｏｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌ ｗａｌｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｉｎ ｚｙｇｏｔｉｃ
ａｎｄ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｏｆ Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ (Ｌ.) ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｓｏｌｉｄ
在流式细胞仪分析结果的基础上ꎬ通过 ＤＡＰＩ 染色
ａｎｄ ｉｎ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉａ [Ｊ]. Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍａꎬ ２４９(１): １１７－１２９.
及显微观测对获得的细胞核膜完整性进行检测ꎬ ＤＯＮＧ ＪＺꎬ ＤＵＮＳＴＡＮ ＤＩꎬ １９９６. Ａ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ
结果发现ꎬ经 ＬＢ０１ 提取欧洲云杉 ＰＥＭ 细胞核被 ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＲＮＡ ｆｒｏｍ ｖａｒｉｏｕｓ ｃｏｎｉｆｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ [ Ｊ]. Ｐｌａｎｔ
染上 清 晰 的 蓝 色 荧 光ꎬ 核 膜 完 整ꎮ 这 与 陈 林 等 Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓꎬ １５: ５１６－５２１.
ＤＯＬＥＺＥＬ Ｊꎬ ＢＡＲＴＯＳ Ｊꎬ ２００５. Ｐｌａｎｔ ＤＮＡ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ
(２０２０)使用 ＤＡＰＩ 染色观测大豆根细胞核呈饱满
ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｇｅｎｏｍｅ ｓｉｚｅ [ Ｊ]. Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙꎬ
的圆形或者椭圆形悬浮在核提取液结果较为一
９５: ９９－１１０.
致ꎬ说明 ＬＢ０１ 提取获得的欧洲云杉 ＰＥＭ 细胞核 ＤＯＬＥＺＥＬ Ｊꎬ １９９１. Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ
保持了完整的核膜结构ꎮ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｈｉｇｈｅｒ ｐｌａｎｔｓ [ Ｊ]. Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓꎬ ２:
１４３－１５４.
综上所述ꎬ本研究通过比较分析 ６ 种不同提取
ＤＯＬＥＺＥＬ Ｊꎬ ＧＲＥＩＬＨＵＢＥＲ Ｊꎬ ＳＵＤＡ Ｊꎬ ２００７. Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ
液的核提取效率发现ꎬＬＢ０１ 提取云杉 ＰＥＭ 得到的
ｎｕｃｌｅａｒ ＤＮＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ ｕｓｉｎｇ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ [ Ｊ].
细胞核数量最多ꎬ碎片占比少ꎬ其提取效率在不同 Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓꎬ ２(９): ２２３３－２２４４.