Page 109 - 《广西植物》2025年第8期
P. 109
ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍ
Ｇｕｉｈａｉａ Ａｕｇ. ２０２５ꎬ ４５(８): １４７５－１４８３
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２４０１００２
胡继文ꎬ 高晗ꎬ 王军辉ꎬ 等ꎬ ２０２５. 基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ４５(８):
１４７５－１４８３.
ＨＵ ＪＷꎬ ＧＡＯ Ｈꎬ ＷＡＮＧ ＪＨꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２５. Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｎｕｃｌｅｉ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ ｆｏｒ Ｐｉｃｅａ ａｂｉｅｓ ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ
ｍａｓｓｅｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ４５(８): １４７５－１４８３.
基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选
胡继文 ꎬ 高 晗 ꎬ 王军辉 ꎬ 朱天擎 ２∗
１
１
３
( １. 中国林业科学研究院林业研究所ꎬ 国家林业和草原局林木培育重点实验室ꎬ 林木遗传育种全国重点实验室ꎬ 北京 １０００９１ꎻ
２. 中国林业科学研究院ꎬ 林木遗传育种全国重点实验室ꎬ 北京 １０００９１ꎻ ３. 三峡植物园管理处ꎬ 湖北 宜昌 ４４３１１１ )
摘 要: 细胞核悬液是开展多种分子生物学研究的重要基础ꎮ 为高效制备欧洲云杉( Ｐｉｃｅａ ａｂｉｅｓ) 原胚团
(ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ ｍａｓｓｅｓꎬ ＰＥＭ)细胞核悬液ꎬ该研究应用流式细胞仪检测 ＤＮＡ 含量ꎬ对 ＬＢ０１、Ｏｔｔｏｓ、Ｇａｌｂｒａｉｔｈｓ、
ＧＰＢ、ＷＰＢ 和 ＴｒｉｓＭｇＣｌ ６ 种细胞核提取液提取的欧洲云杉胚性细胞系 ＰａＶⅢ、ＰＩ３、ＰＩ５ 的 ＰＥＭ 细胞核数量
２
和质量进行评估ꎬ筛选最适提取液ꎬ并对最适提取液稳定性和细胞核完整性进行检测ꎮ 结果表明:(１)与其他
提取液相比ꎬ欧洲云杉胚性细胞系 ＰａＶⅢ ＰＥＭ 经 ＬＢ０１ 提取获得的细胞核数量最多且细胞碎片少ꎮ (２)ＰＥＭ
经 ＬＢ０１ 提取获得的细胞核 Ｇ０/ Ｇ１ 和 Ｇ２/ Ｍ 的核变异系数均小于 ５％ꎬ变异系数小ꎮ (３)不同欧洲云杉细胞系
ＰＥＭ 经 ＬＢ０１ 提取的细胞核数量及细胞碎片无显著性差异ꎬ稳定性高ꎮ (４)显微观测显示ꎬＬＢ０１ 提取欧洲云
杉 ＰＥＭ 获得的细胞核膜保持较高的完整性ꎮ 综上认为ꎬＬＢ０１ 提取欧洲云杉 ＰＥＭ 细胞核能表现出更好的核
质量ꎬ可作为欧洲云杉首选细胞核提取液ꎮ 该研究结果为裸子植物细胞核的提取提供了参考ꎮ
关键词: 针叶树ꎬ 欧洲云杉ꎬ 原胚团ꎬ 植物细胞核提取ꎬ 流式细胞仪
中图分类号: Ｑ９４２ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２５)０８￣１４７５￣０９
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｎｕｃｌｅｉ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ ｆｏｒ
Ｐｉｃｅａ ａｂｉｅｓ ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ ｍａｓｓｅｓ ｂａｓｅｄ
ｏｎ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ
１
１
３
ＨＵ Ｊｉｗｅｎ ꎬ ＧＡＯ Ｈａｎ ꎬ ＷＡＮＧ Ｊｕｎｈｕｉ ꎬ ＺＨＵ Ｔｉａｎｑｉｎｇ ２∗
( １. Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｒｅｅｄｉｎｇꎬ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔａｔｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ Ｇｒａｓｓｌａｎｄ
Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎꎬ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙꎬ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００９１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｒｅｅｄｉｎｇꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙꎬ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００９１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３. Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ
Ｏｆｆｉｃｅ ｏｆ Ｔｈｒｅｅ Ｇｏｒｇｅｓ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｇａｒｄｅｎꎬ Ｙｉｃｈａｎｇ ４４３１１１ꎬ Ｈｕｂｅｉꎬ Ｃｈｉｎａ )
收稿日期: ２０２４－０６－２５ 接受日期: ２０２４－０７－２８
基金项目: 国家重点研发计划项目(２０２３ＹＦＤ２２００１０４)ꎻ 中国林业科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金
(ＣＡＦＹＢＢ２０２３ＭＢ０４１)ꎻ 国家资助博士后研究人员计划项目( ＧＺＣ２０２３３０１７)ꎻ 林木遗传育种全国重点实验室基本科研业务费
(ＴＧＢＦＲＦ２０２３０１)ꎮ
第一作者: 胡继文(１９９１—)ꎬ博士ꎬ博士后ꎬ研究方向为针叶树体细胞胚胎发生ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)Ｈｕｊｉｗｅｎ０２０＠ １２６.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 朱天擎ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ研究方向为针叶树体细胞胚胎发生繁育技术ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)Ｔｉａｎｑｉｎｇ.ｚｈｕ＠ ｉｃｌｏｕｄ.ｃｏｍꎮ
