Page 66 - 《广西植物》2026年第6期
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６ 期 胡家雪等: 不同生态型硬叶兜兰的氮素利用效率差异比较及其碳氮分配策略 ９ ８ １
异ꎬ这些差异可能共同驱动了两种地生型在氮素 过孔径 ２ ｍｍ 筛后带回实验室ꎬ用于分析土壤理化
利用策略上的分化ꎮ 每类生态型选择 ３ ~ ４ 个居群 性质ꎮ 选择长势良好、大小相近的植株进行生物
进行土壤样本和植株样本采集ꎮ 土壤理化性质测 学采样ꎬ个体材料用锡纸包裹加冰包装ꎬ带回实验
定选择不同种群的代表个体ꎬ同一种生态型的硬 室ꎮ 植物表型测定:对每一生态型选取 ３ 个种群
叶兜兰每个种群随机抽取 ４ ~ ５ 个体采集的土样按 作为生物学重复ꎬ每个种群设 ３ 个重复ꎬ每个生态
等量混合均匀后作为该类型的 １ 个土壤样本ꎬ每 型选取 ９ 个样本ꎮ 植物关键指标测定:从每个生
类生态型作 ３ 个重复ꎬ岩生型共采集 １２ 个个体土 态型中选取 ３ 个种群ꎬ每个种群随机抽取 ３ 个植株
样ꎬ林下地生型和灌丛地生型各采集 １５ 个个体土 个体的剪碎叶片等量混合后作 １ 个重复ꎬ共计 ３ 个
样ꎮ 采用“抖落法”采集土样ꎬ去除可见植物残体ꎬ 重复ꎮ
表 １ 硬叶兜兰生境特点
Ｔａｂｌｅ １ Ｈａｂｉｔａｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ｐａｐｈｉｏｐｅｄｉｌｕｍ ｍｉｃｒａｎｔｈｕｍ
海拔 土层厚度 居群数 个体数
生态型 生境类型 郁闭度
Ａｌｔｉｔｕｄｅ Ｓｏｉｌ ｌａｙｅｒ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
Ｅｃｏｔｙｐｅ Ｈａｂｉｔａｔ ｔｙｐｅ Ｃａｎｏｐｙ ｄｅｎｓｉｔｙ
(ｍ) (ｃｍ) ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ
岩生型 附生于石壁上 无植被遮挡
０ ~ ３ ３ ４４
Ｌｉｔｈｏｐｈｙｔｉｃ ｔｙｐｅ Ａｔｔａｃｈｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｓｔｏｎｅ ｗａｌｌ Ｎｏ ｖｅｇｅｔａｔｉｏｎ ｃｏｖｅｒ
生长在低矮灌木丛
灌丛地生型 １ ４９０~
１０ ~ １５ Ｇｒｏｗｉｎｇ ｉｎ ｌｏｗ ｓｈｒｕｂｂｅｒｙ ４０％ ~ ５０％ ４ ５０
Ｓｃｒｕｂ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ ｔｙｐｅ １ ５１０
(４０－５０ ｃｍ)
生长在林下
林下地生型
１０ ~ ２０ Ｇｒｏｗｉｎｇ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｆｏｒｅｓｔ ｃａｎｏｐｙ ６０％ ~ ７０％ ４ ５３
Ｕｎｄｅｒｓｔｏｒｙ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ ｔｙｐｅ
(１５０－１７０ ｃｍ)
１.３ 试验方法 净、擦干后剪碎ꎬ准确称取适量样品ꎬ置于 ２ ｍＬ 离
１.３.１ 土壤样品分析 硝态氮和铵态氮测试使用 心管中ꎬ立即投入液氮中速冻ꎬ随后转移至－８０ ℃
新鲜土样ꎬ其他理化指标测试使用风干土样ꎮ 土 超低温冰箱保存ꎬ用于后续指标测定ꎮ
壤全氮、碱解氮、硝态氮、铵态氮、有机质、有效磷、 叶绿素 ａ、ｂ 含量采用 ８０％ 丙酮 浸 取 法 测 定
速效钾 含 量、 土 壤 含 水 量 测 试 方 法 参 阅 鲍 士 旦 (赵京东等ꎬ２０２０)ꎻ可溶性蛋白含量采用考马斯亮
(２０００)的方法ꎮ 蓝 Ｇ￣２５０ 染色法( 焦洁ꎬ２０１６) 测定ꎻＮＲ 活性参照
１.３.２ 植物表型测定 将样品置于 １０５ ℃ 烘箱(产 陈薇和张德颐( １９８０) 的方法测定ꎻ ＲｕＢＰＣａｓｅ 活
品型号:ＭＯＶ￣２１２Ｆꎬ日本) 中杀青 ３０ ｍｉｎꎬ再转移至 性和 ＧＳ 活性参照« 植物生理学实 验» ( 刘 萍 等ꎬ
(６５±２) ℃条件下烘干至恒重ꎮ 分别称量地上部分 ２０１６)中所述流程进行测定ꎮ
与根的干重ꎬ并计算总生物量及根冠比(Ｃｕｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ １.３.４ 植物碳氮含量测定 将烘干后的叶和根粉
２０２３)ꎮ 根 系 总 长 度 使 用 ＩｍａｇｅＪ 软 件 ( Ｎａｔｉｏｎａｌ 碎并过 ０.２５ ｍｍ 筛ꎬ用凯氏定氮法测定叶片和根
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ ＵＳＡ)进行数字化测量ꎮ 部的 氮 含 量ꎬ采 用 湿 烧 法 ( Ｋ Ｃｒ Ｏ － Ｈ ＳＯ 氧 化
２ ２ ７ ２ ４
１.３.３ 氮碳同化关键指标测定 选择光合碳同化 法)测定叶片和根部的碳含量( 鲍士旦ꎬ２０００)ꎬ计
过程的关键酶 １ꎬ５￣二磷酸核酮糖羧化酶( ｒｉｂｕｌｏｓｅ￣ 算碳氮比(Ｃ / Ｎ)ꎬ每一类型作 ３ 个重复ꎮ
１ꎬ５￣ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅꎬ ＲｕＢＰＣａｓｅ)ꎬ以 及 氮 １.３. ５ 氮 效 率 相 关 指 标 的 计 算 氮 吸 收 效 率
代 谢 途 径 的 关 键 酶———硝 酸 还 原 酶 [ ｎｉｔｒａｔｅ (ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｕｐｔａｋｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙꎬＮＵｐＥ)计算参考吴姝瑾
ｒｅｄｕｃｔａｓｅꎬ ＮＲꎬ以单位鲜重( ｇ) 叶片单位时间( ｈ) 等(２０２２)的方法ꎬ氮利用效率( ＮＵＥ) 计算参考徐
内还原的 ＮＯ ( μｇ) 为单位] 和谷氨酰胺合成酶 红卫等(２０２４) 的方法ꎬ单位根长吸氮量( ｎｉｔｒｏｇｅｎ
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(ｇｌｕｔａｍｉｎｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅꎬ ＧＳ) 进行测试ꎮ 取样时ꎬ从 ｕｐｔａｋｅ ｐｅｒ ｕｎｉｔ ｒｏｏｔ ｌｅｎｇｔｈꎬＮＵＲＬ) 计算参考战健等
每株生长健壮、无病虫害的植株上ꎬ选取从茎基部 (２０２３)的方法ꎬ计算公式如下:
计数的第 ２ 片成熟功能叶ꎮ 叶片经蒸馏水快速洗 植株氮积累量( ｍｇ) ＝ 叶干重×叶氮含量＋根
