Page 56 - 《广西植物》2020年第9期
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9 期                王芬等: 基于高通量测序的都匀地区福鼎大白种茶树根茎叶分析                                          1 2 7 1

   在干冰中送往北京百迈客生物科技有限公司进行
   二代 Illumina 高通量测序ꎬ对测序数据进行质量控                      2  结果与分析
   制ꎬ并将二代得到的转录本与已测序的中国种茶
   树基因组通过序列比对的方法进行比较ꎮ 然后进                            2.1 测序数据质量分析
   行转录组文库质量评估、SNP / InDel 分析、可变剪                         从茶苗上分别取福鼎大白的根茎叶作为实验

   接事件预测、差异基因分析和差异外显子分析等ꎮ                            材料进行转录组测序ꎬ碱基质量值达到 Q30 的在
       Illumina 二代测序数据提交至 NCBI 的 SRA 数               93.22%以上ꎬGC 含量为 44.56% ~ 45.85%( 表 1)ꎬ

   据库ꎬBioProject 的编号为 PRJNA562747ꎮ                   结果表明转录组文库质量符合分析要求ꎮ

                                       表 1  样品数据产出统计表
                                  Table 1  Output statistics among samples

           样品             高质量 Reads 数目            数据量                 GC 含量           准确率>0.999
           Sample         Clean Reads number     Clean bases       GC content (%)       Q30 (%)
         叶 1 Leaf 1          21 828 512         6 502 479 526         45.36              93.62
         叶 2 Leaf 2          28 450 839         8 467 453 936         45.21              94.22
         叶 3 Leaf 3          29 057 531         8 663 984 698         45.18              93.80
         茎 1 Stem 1          21 212 767         6 326 706 172         44.71              93.70
         茎 2 Stem 2          25 760 743         7 695 169 918         45.35              93.65
         茎 3 Stem 3          26 080 601         7 745 810 876         44.56              93.79
         根 1 Root 1          23 789 995         7 078 295 558         45.85              93.22
         根 2 Root 2          29 354 206         8 728 835 412         45.61              93.48
         根 3 Root 3          32 496 205         9 667 694 674         45.72              93.54


                                       表 2  转录组与基因组比对
                                   Table 2  Transcriptome blast to genome
                                           比对到参考          比对到参考          比对到参考         比对到参考
                           比对到参考基因      基因组唯一位置的          基因组多处的        基因组正链的        基因组负链的
              总 Clean Reads
      样品          数目      组上的 Reads 数目     Reads 数目        Reads 数目      Reads 数目      Reads 数目
                           (在 Clean Reads  (在 Clean Reads  (在 Cleans Reads  (在 Clean Reads  (在 Clean Reads
      Sample    Total Clean
                           中占的百分比)        中占的百分比)        中占的百分比)       中占的百分比)       中占的百分比)
               Reads number
                            Mapped Reads   Uniq Mapped   Multiple Mapped  Reads Mapped  Reads Mapped
                                             Reads           Reads        to ‘ +’        to ‘ -’
       叶 1      43 657 024   39 632 673    37 386 481      2 246 192     19 481 885    19 587 096
      Leaf 1                 (90.78%)      (85.64%)        (5.15%)       (44.62%)      (44.87%)
       叶 2      56 901 678   51 861 422    48 949 427      2 911 995     25 493 617    25 604 077
      Leaf 2                 (90.09%)      (86.02%)        (5.12%)       (44.80%)      (45.00%)
       叶 3      58 115 062   52 353 177    49 391 581      2 961 596     25 733 339    25 849 934
      Leaf 3                 (90.09%)      (84.99%)        (5.10%)       (44.28%)      (44.48%)
       茎 1      42 425 534   38 353 796    36 275 113      2 078 683     18 802 471    18 912 508
      Stem 1                 (90.40%)      (85.50%)        (4.90%)       (44.32%)      (44.58%)
       茎 2      51 521 486   46 959 156    44 300 646      2 658 510     22 986 304    23 138 767
      Stem 2                 (91.14%)      (85.98%)        (5.16%)       (44.61%)      (44.91%)
       茎 3      52 161 202   46 917 710    44 231 706      2 686 004     22 960 018    23 121 829
      Stem 3                 (89.95%)      (84.80%)        (5.15%)       (44.02%)      (44.33%)
       根 1      47 579 990   41 789 100    38 194 971      3 594 129     19 697 394    20 253 048
      Root 1                 (87.83%)      (80.28%)        (7.55%)       (41.40%)      (42.57%)
       根 2      58 708 412   52 846 174    49 318 371      3 527 803     25 605 318    25 872 980
      Root 2                 (90.01%)      (84.01%)        (6.01%)       (43.61%)      (44.07%)
       根 3      64 992 410   58 353 149    54 585 798      3 767 351     28 312 409    28 598 694
      Root 3                 (89.78%)      (83.99%)        (5.80%)       (43.56%)      (44.00%)
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