Page 138 - 《广西植物》2023年第2期
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             B1-B24. 24 个枫香个体ꎻ M. 500 bp ladder DNA Markerꎮ
             B1-B24. 24 Liquidambar formosana individualsꎻ M. 500 bp ladder DNA Marker.
                                           图 1  24 份枫香材料扩增结果 (LF229)
                               Fig. 1  Amplification of 24 Liquidambar formosana using primer (LF229)


                     表 5  18 对 SSR 引物多态性信息
                                                               3  讨论与结论
                   Table 5  Information on polymorphism of
                          18 pairs of SSR primers
                                            重复     退火温度        3.1 枫香转录组 SSR 位点分布特征
            引物编号        引物序列 (5′-3′)        基元     Annealing       SSR 标记具有在植物种间通用性的优点ꎬ同属
            Primer No.  Primer sequence (5′-3′)  Repeat  temperature
                                             motif   (℃ )      植物中移植已有标记进行开发 SSR 的研究已不少
            LF53    F:AGGAACCCAATTTGACCCCT   (TGG) 6  60.0     见(杨世鹏等ꎬ 2018)ꎬ而目前可用的枫香 SSR 引
                    R:CCACCCACCAATGCTCAGAT
                                                               物较少ꎬ仅报道的有顾辛韵(2016) 采用磁珠富集
            LF76    F:CAGCACTTCCATAAAGCCGC  (CCAT) 5  60.0
                    R:GTTCTGACGCCTTCTGGTGA                     法开发的 10 对引物及孙荣喜(2017)通过 NCBI 数
            LF89    F:TGAAATTTTGCGTGGGCTGG  (GGCT) 5  57.3
                    R:ACAAGTGGGCTCAAATGAGT                     据库信息开发了 11 对引物ꎮ 磁珠富集法主要是
            LF108   F:GCAATAGCCGTTCCCTTTGC   (TTCT) 5  60.0
                    R:CACGGTCTCACTGCCTGATT                     通过构建微卫星富集文库ꎬ经阳性克隆、筛选、测
            LF111   F:CGGAGCTCGTGATTTCAGGT   (TTTC) 5  60.6
                    R:AGAACCGGTTCCTCGTAACA                     序最终得到 SSR 位点信息ꎬ这两个方法在一定程
            LF112   F:ATCAGTGTGTAGGCCGAACC   (TTTG)5  58.6     度上提高了 SSR 引物开发效率ꎬ但操作过程繁琐
                    R:AGCCAATCACCACACACCAA
                                                               且需要构建和筛选基因组文库ꎬ开发难度较大ꎬ获
            LF128   F:CACACCACTCCACTCCGATC   (CCA) 7  60.0
                    R:ATGTTGAGGGAGCGAAGGTG
                                                               得的 SSR 位点信息有限ꎻ通过 NCBI 数据库开发
            LF129   F:GTATGATCGCCCTCCCACTG   (CCG) 7  60.0
                    R:ACAGAAGCTGAGGTTGAGGC
            LF171   F:ACTCACACTCCCACACTCCA   (CCT) 8  60.0     SSR 引物的方法使得研究者可以从中获得有效信
                    R:AAACTCGAAGACCCAGCGAG                     息ꎬ节省了时间和成本ꎬ但当前数据库中的枫香序
            LF177   F:CCACTGCCTCAGGGTTTCTT  (GAAG) 6  60.0
                    R:CTTCACCTGGAAGTGGGTCG                     列数据有限ꎬ能获得的 SSR 位点信息较少且无法
            LF188   F:TTCTGTGACTGGGCAATGGG   (TAA) 8  59.8
                    R:CGAGTCCTCACATTCCACGT                     对枫香 SSR 位点信息分布特征进行详细描述ꎮ 随
            LF190   F:TGGTGCCTTCTTGGACCTTT   (TATT) 6  60.0
                    R:CACAACAAACGAGGAAGCCG                     着高通量测序技术的发展ꎬRNA ̄seq 测序的成本正
            LF206   F:CAAATGCGAATGAGCGGGAG (AAAGG) 5 60.0      逐渐降低ꎬ基于转录组数据开发 EST ̄SSR 分子标
                    R:GGGCAAAAGGGACAGGATGT
                                                               记ꎬ目前已成为基因发掘及分子标记开发的重要
            LF224   F:ACAGGCTGTGGGATTAGCAC  (GAAGG) 5 60.0
                    R:GTCGTCAGAGTGGCCAGAAA
            LF229   F:GCTACCGTTGCCTCCTTCAT  (TTTCC) 5 59.8     技术手段ꎮ 本研究首次通过转录组测序技术获得
                    R:TGGTCTTGGAGCAGATGACG
            LF242   F:TCTCATCGCACTCCTAGGGT   (GAA) 9  60.0     了相对较多且较全面的枫香 SSR 位点信息ꎮ 本研
                    R:GTGAGTGGAGAGGGGGAGAT
                                                               究发现ꎬ作为第三纪的孑遗植物ꎬ枫香转录组中 SSR
            LF245   F:GTGCTGGATCTCTGGCACAA   (GCA) 9  59.9
                    R:GACCAATGTATCCCGGGGAC                     基元重复类型较为丰富ꎬ包含了 6 种核苷酸重复的
            LF247   F:GGAAGTACCACTCCTTCGGC   (GCG) 9  60.0
                    R:GAAACTCCGAATTCGACGCG                     所有类型ꎬ 高比例的单核苷酸重复序列(46.54%)
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