Page 152 - 《广西植物》2026年第4期

７ １ ０ 广 西 植 物 ４６ 卷
是蔗糖或乳糖ꎻ常春义等(２０１８) 则认为细萼连蕊 粉 ２４ ｈ 后取出收集花粉于 ５ ｍＬ 离心管中(金亦佳
茶( Ｃ. ｔｓｏｆｕｉ) 的花粉培养的适宜碳源是蔗糖ꎻ张 等ꎬ２０２２)ꎬ拧紧管盖ꎬ用封口膜缠紧瓶口后置于
亚利 等 ( ２０２３ ) 研 究 了 茶 属 连 蕊 茶 组 ( ｓｅｃｔ. －２０ ℃ 冰箱中密封干燥保存ꎬ备用ꎮ
Ｔｈｅｏｐｓｉｓ) 和 毛 蕊 茶 组 ( ｓｅｃｔ. Ｅｒｉａｎｄｒｉａ) 的 ２０ 种 １.２ 试验方法
( 变种) 的花粉形态特征ꎬ认为花粉的形态特征支 １.２.１ 不同种质尖连蕊茶花粉育性测定 ( １) 花

持连蕊茶组和毛蕊茶组植物为单系类群的观点ꎻ 粉数量测定:采用纤维素酶法测定单花药花粉量
李广清等( ２００５) 以连蕊茶组 ６ 种植物花粉为研 ( 谢再成等ꎬ２０２０) ꎮ 每个梵净山尖连蕊茶优株分
究对象ꎬ开展了花粉形态特征观察ꎬ发现花粉外 别取完整花药 ６０ 枚ꎬ随机均等分成 ３ 份ꎬ分别放
壁纹饰存在一定差异ꎬ可作为组内种间的区分依 入 １.５ ｍＬ 离心管中ꎬ加入 １％ 纤维素酶 １ ｍＬ 处
据ꎻ 许 林 等 ( ２０１０ ) 对 川 鄂 连 蕊 茶 ( Ｃ. 理 ２４ ｈꎬ充分振荡ꎬ使花粉粒均匀分布于溶液中ꎬ
ｒｏｓｔｈｏｒｎｉａｎａ) 花粉的形态和生活力进行了较为系 用微量 移 液 枪 吸 取 ５ μＬ 溶 液 滴 于 凹 面 载 玻 片
统的研究ꎬ推断川鄂连蕊茶在山茶属中具有较为 上ꎬ在光学显微镜下观察统计ꎬ重复 ３ 次ꎮ 计算
特殊的分类地位ꎬ在适宜的培养条件下花粉萌发 公式如下:
率高达 ９４.２８％ꎮ 当前ꎬ有关贵州梵净山尖连蕊 Ｍ ＝ (ｍ×２００) / ２０ꎮ
茶的花粉育性与形态的研究鲜有报道ꎮ 此外ꎬ仅 式中: Ｍ 为每枚花药花粉量( 粒 / 花药)ꎻｍ 为
少数连蕊茶种质被引种驯化并用于杂交育种ꎬ其 载玻片上总花粉粒数ꎻ２００ 为稀释倍数ꎻ２０ 为花药
在高抗逆性和芳香性状等种质创制方面的潜力 数量ꎮ
尚未充分释放ꎮ (２)花粉活力测定:将花粉从－２０ ℃ 冰箱中取
鉴于此ꎬ本研究以 ９ 个梵净山尖连蕊茶种质的 出ꎬ于 ４ ℃ 下放置 ２ ｈꎬ再移至室温下放置 ２ ｈꎬ使
优株为材料ꎬ通过纤维素酶分解法测定花粉数量ꎬ 花粉逐渐解冻ꎬ用干净毛刷蘸取少许花粉均匀抖
采用琼脂离体萌发培养法测定花粉活力ꎬ运用扫 落于提前配置好的固体培养基(１０％蔗糖＋ ５％琼
￣１
描电子显微镜观察其花粉的形态特征并开展聚类 脂＋１００ ｍｇＬ 硼酸)上ꎬ置于 ２８ ℃ 恒温箱暗培养
分析ꎬ拟探讨以下问题:(１) ９ 个梵净山尖连蕊茶 ２ ｈꎬ采用光学显微镜观察、拍照ꎮ 每个样本选取 ３
种质的花粉数量和花粉活力差异ꎻ(２)９ 个梵净山 个不同视野进行统计ꎬ确保每个视野的花粉粒数≥５０
尖连蕊茶种质的优株花粉形态特征ꎻ(３) 基于花粉 粒ꎮ 根据萌发标准(花粉管长度超过花粉粒直径 ２
形态的 ９ 个梵净山尖连蕊茶种质的优株亲缘关 倍判定为萌发)ꎬ统计花粉萌发率ꎬ以花粉萌发率
系ꎮ 本研究旨在为梵净山尖连蕊茶种质的鉴定、 表示花粉活力ꎮ 花粉萌发率(％) ＝ ( 萌发花粉数 /
杂交育种及开发利用提供等方面提供参考依据ꎮ 视野总花粉数) ×１００ꎮ
１.２.２ 不同种质尖连蕊茶花粉形态测定 花粉经
１ 材料与方法 处理 后ꎬ 采 用 导 电 胶 粘 在 样 品 台 上ꎬ 喷 金 后 在

ＪＳＭ￣６３８０ ＬＶ 型( 日 本 电 子) 扫 描 电 子 显 微 镜 下
１.１ 试验材料 观察ꎮ 每个样品花粉取 ３０ 粒ꎬ采用 ＩｍａｇｅＪ １.８.０
供试材料采自贵州省梵净山地区连蕊茶分布 软件测量供试样品花粉粒极轴长( Ｐ) 、赤道轴长

核心 区 ( １０８° ４５′５５″—１０８° ４８′３０″Ｅ、２７° ４９′５０″— ( Ｅ) 、萌发沟长( Ｌ) ꎬ计算不同花粉粒 大 小 ( Ｐ ×
２８°０１′３０″Ｎ)共 ９ 个课题组前期筛选的优株ꎬ选优 Ｅ) 、极轴与赤道轴比( Ｐ / Ｅ) 、萌发沟长与赤道轴
标准为枝条花朵数平均大于 ８ 朵、生长健壮、抗病 比( Ｌ / Ｅ) ꎬ并观察其形状及外壁纹饰等特点ꎮ 花

虫 害 ( 编 号 分 别 为 ＦＪＳＣＦ１、 ＦＪＳＣＦ３、 ＦＪＳＣＦ４、 粉形态 的 描 述 参 考 韦 仲 新 ( １９９７) 和 李 广 清 等
ＦＪＳＣＦ８、 ＦＪＳＣＦ９、 ＦＪＳＣＦ１０、 ＦＪＳＣＦ１１、 ＦＪＳＣＦ１２、 (２００５) ꎮ
ＦＪＳＣＦ１３)ꎮ 于 ２０２４ 年 ３ 月中旬ꎬ分别采集每个优 １.３ 数据分析
株上生长良好的、大蕾期的花朵均为 ５０ 朵ꎬ剥下 利用 Ｅｘｃｅｌ ２０２１ 和 ＳＰＳＳ ２７ 统计软件进行分
花药ꎬ取 ２０ 粒饱满、未开裂的花药用于单个花药 析ꎬ用 Ｄｕｎｃａｎ 法进行多重比较( ＬＳＤ) 和单因素方
花粉量测定ꎻ其余花药置于硫酸纸中ꎬ于 ８０ Ｗ 灯 差分析(ｏｎｅ￣ｗａｙ ＡＮＯＶＡ)ꎮ 选取 Ｐ、Ｅ、Ｌ、Ｐ / Ｅ、Ｐ ×
泡下烘烤 ３ ~ ４ ｈꎬ温度保持在 ２８ ℃ ꎬ使花药开裂散 Ｅ、Ｌ / Ｅ ６ 个定量指标ꎬ应用 ＳＰＳＳ ２７ 统计软件采用