Page 149 - 《广西植物》2020年第5期

５ 期 涂勋良等: ＨＰＬＣ 法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量 ７ ４ ５

ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ. Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａｎ Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ￣Ｃ１８
(２５０ ｍｍ × ４.６ ｍｍꎬ ５ μｍ) ｃｏｌｕｍｎ. Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ ０.１％ ａｑｕｅｏｕｓ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ (Ａ) ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ
￣１
(Ｂ) ｗａｓ ｉｎｖｏｋｅｄ ａｓ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ａｔ １.０ ｍＬｍｉｎ . Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ３０ ℃ ａｎｄ
ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２１０ ｎｍ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｌｉｍｏｎｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｌｅｍｏｎ ｐｅｅｌ ｏｆ
ｔｈｒｅｅ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｒｅａｓ ｗａｓ Ｒｕｉｌｉꎬ Ｙｕｎｎａｎ (ＥＵＲ＿Ｄ)ꎬ Ａｎｙｕｅꎬ Ｓｉｃｈｕａｎ (ＥＵＲ＿Ｃ) ａｎｄ Ｈｅｙｕａｎꎬ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ (ＥＵＲ＿Ｙ)
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｎｏｍｉｌｉｎ ｗａｓ ＥＵＲ＿Ｄꎬ ＥＵＲ＿Ｃ ａｎｄ ＥＵＲ＿Ｙꎻ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｌｉｍｏｎｉｎ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｖａｒｉｅ￣
ｔｉｅｓ ｏｆ ｌｅｍｏｎ ｐｅｅｌ ｗａｓ Ｍｅｙｅｒ ｌｅｍｏｎ (Ｍ＿ＮＭ)ꎬ Ｒｏｕｇｈ ｌｅｍｏｎ (Ｒ＿ＮＭ)ꎬ Ｓｅｅｄｌｅｓｓ ｌｅｍｏｎ (Ｓ＿ＮＭ)ꎬ Ｇｅｎｏａ (ＲＮＹ) ａｎｄ
Ｌｉｓｂｏｎ (ＬＳＢ)ꎬ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｎｏｍｉｌｉｎ ｗｅｒｅ Ｓ＿ＮＭꎬ Ｒ＿ＮＭꎬ ＬＳＢꎬ ＲＮＹ ａｎｄ Ｍ＿ＮＭ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｌｉｍｏｎｉｎ ａｎｄ ｎｏｍｉｌｉｎ ｉｎ ｌｅｍｏｎ ｐｅｅｌ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ ａｎｄ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｗａｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ. Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｐｒｏ￣
ｖｉｄｅ ａ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬ ｒｅｓｏｕｒｃｅ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎ￣ｄｅｐｔｈ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｌｅｍｏｎ ｆｒｕｉｔｓ ｆｒｏｍ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ ａｎｄ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｃｉｔｒｕｓ ｌｉｍｏｎꎬ ｌｉｍｏｍｉｎꎬ ｎｏｍｉｌｉｎꎬ ｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ (ＨＰＬＣ)

柠檬苦素类似物( ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ) 是存在于芸香科 ２００４ꎻＷｏｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００６)、 ＬＣ￣ＴｏＦ/ ＭＳ ( Ｙｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ
(Ｒｕｔａｃｅａｅ)和楝科( Ｍｅｌｉａｃｅａｅ) 植物中的一类具有 １９９３)ꎮ Ｂｉｌａｌ ｅｔ ａｌ.(２０１３)采用 ＨＰＬＣ 法测得血橙中
呋喃 环 并 且 高 度 氧 化 的 三 萜 类 次 生 代 谢 产 物 柠檬苦素为 ４７９.７７ μｇｍＬ ꎬ粗柠檬中诺米林为
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(Ｍａｉｅｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９７７)ꎮ 在柑橘属中主要有苷元和 ５４.２３ μｇｍＬ ꎬ甜橙‘ｓｕｃｃａｒｉ’ 中诺米林仅为 ０.３７
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糖苷两大类( 潘利华等ꎬ ２００７)ꎬ它们是引起柑橘 μｇｍＬ ꎮ 孟鹏和郑宝东(２０１２) 采用 ＵＰＬＣ 法测
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属果汁泛苦的主要原因之一ꎮ 迄今已从柑橘属中 得柠檬苦素含量依次为琯溪蜜柚>脐橙>尤溪金柑>
分离 出 ３８ 种 类 似 物 和 ２１ 种 配 糖 体 ( Ｍａｎｎｅｒｓꎬ 柑橘ꎬ诺米林含量依次为脐橙>琯溪蜜柚>柑橘>尤
２００７)ꎬ常见的有柠檬苦素( ｌｉｍｏｍｉｎ)、诺米林( ｎｏ￣ 溪金柑ꎮ 彭腾等(２０１２) 采用 ＲＰ￣ＨＰＬＣ 法测得柠
ｍｉｌｉｎ)、奥巴叩酮( ｏｂａｃｕｎｏｎｅ)、诺米林酸( ｎｏｍｉｌｉｎｉｃ 檬苦素含量依次为沙糖桔( 金堂) >蜜橘( 广元) >
ａｃｉｄ)和脱乙酰诺米林( ｄｅａｃｅｔｙｌｎｏｍｉｌｉｎ) 等ꎮ 诺米 蜜橘(龙泉) >椪柑( 新津) >椪柑( 金堂) >广柑( 青
林在 植 物 茎 韧 皮 部 合 成 并 转 移 至 其 他 组 织 白江) >蜜橘(蒲江)ꎮ
(Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００３)ꎬ在酶的作用下ꎬ通过不同 为了提高柠檬副产物的高效利用率ꎬ促进柠
生物合成途径合成柠檬苦素、醋酸柠檬苦酯、宜昌 檬产业蓬勃发展ꎬ本研究选取了 ３ 个不同产地和 ５

根辛 和 卡 拉 敏 等 类 似 物 ( 蔡 护 华 和 桥 永 文 男ꎬ 个不同品种柠檬为供试材料ꎬ采用 ＨＰＬＣ 法对柠
１９９６)ꎮ 柠檬苦素类似物具有抗癌( Ｔａｎａｋａ ｅｔ ａｌ.ꎬ 檬苦素和诺米林含量进行定性和定量分析ꎬ发现
不同柠檬果品间的含量差异ꎬ为柠檬品种鉴定、资
２０００ꎻＭｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００４ )、 抗 氧 化 ( Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ
２００５ꎻＺｏｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６)、抑菌(罗水忠等ꎬ ２００６ꎻ李 源开发利用提供理论依据ꎬ从而提高柠檬果品的
彪等ꎬ ２０１２ｂ)、抗炎镇痛( 温靖等ꎬ ２００７)、除虫杀 综合利用价值ꎮ

虫(李彪等ꎬ ２０１２ａ)、抑制 ＨＩＶ 病毒复制( Ｂａｔｔｉｎｅｌｌｉ
ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００３ꎻＹｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)、降低胆固醇等多种 １ 材料与方法

生物活性ꎮ
目前ꎬ柠檬苦素类似物主要测定方法有分光光 １.１ 材料、仪器和试剂

度法( 田庆国和丁霄霖ꎬ １９９９)、放射免疫测定法 样品为相同成熟度的成熟柠檬果实ꎬ柠檬样
品信息详见表 １ꎮ 将果肉与果皮分离ꎬ果皮样品经
(Ｍｃｉｎｔｏｓｈꎬ ２０００)、薄层色谱法(Ｏｈｔａ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９９３)、
毛细管胶束电色谱方法(Ｒａｙｎｏｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)、快速 冷冻干燥→粉碎后备用ꎮ
色谱法(ｆｌａｓｈ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ)(Ｒａｍａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)、 ＢＴ１２４Ｓ 电子天平( 北京赛多利斯仪器系统有
限公司)ꎻＦＷ￣８０ 高速万能粉碎机( 天津泰斯特仪
高效液相色谱法( Ｂｉｌａｌ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３ꎻＢｒｅｋｓａ ｅｔ ａｌ.ꎬ
器有限公司)ꎻ ＬＣ￣２０ＡＢ 型高效液相色谱仪 (日本
２０１５ꎻＭａｎｎｅｒｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)、ＬＣ / ＭＳ(Ｍａｎｎｅｒｓ ｅｔ ａｌ.ꎬ